色譜柱的正確使用與保護(hù)

　　色譜柱是有一定壽命的，為了降低分析成本，我們都會(huì)盡量延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。有專家曾對(duì)色譜柱的使用壽命做過(guò)調(diào)查，在2011年的時(shí)候，約有四分之一接受調(diào)查的用戶色譜柱的使用壽命在500針以上，并且接受調(diào)查的用戶中有接近一半的用戶進(jìn)樣次數(shù)超過(guò)了1000次，而進(jìn)樣次數(shù)不到500的用戶不到30%。調(diào)查結(jié)果顯示，從1997年到2011年，進(jìn)樣次數(shù)超過(guò)500次和超過(guò)1000次的用戶比例是逐年增加的，相反小于500次的用戶比例則是下降的。造成這種情況的原因可能有兩方面，一方面是柱子裝填工藝的改進(jìn)，另一方面則是操作人員對(duì)柱子的使用和保護(hù)，而后者可能起的作用更大。
 

　　那么作為分析人員我們?cè)趺幢Ｗo(hù)色譜柱呢?
 

　　首先樣品要經(jīng)過(guò)前處理，前處理過(guò)程中對(duì)樣品中不需要的化學(xué)物質(zhì)和微型顆粒去除的越好，對(duì)柱子壽命的延長(zhǎng)就越有利。經(jīng)過(guò)前處理的樣品在進(jìn)樣之前要經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾，經(jīng)常使用的濾膜有0.45 um和0.2 um兩種，根據(jù)使用的色譜柱選擇不同孔徑的濾膜，濾膜的孔徑不大于色譜柱進(jìn)口篩板的孔徑，我們經(jīng)常使用的濾膜為0.45um。在進(jìn)樣前離心也可以去除微型顆粒，并且有實(shí)驗(yàn)證明，這種方法在沉淀蛋白樣品時(shí)，效果更好。
 

　　使用在線過(guò)濾器，在進(jìn)樣器和柱子或保護(hù)柱之間連接一個(gè)在線過(guò)濾器，可以將過(guò)濾未除掉的微粒攔住，以免進(jìn)入色譜柱。當(dāng)系統(tǒng)壓力增加時(shí)，可以優(yōu)先考慮在線過(guò)濾器的堵塞，出現(xiàn)這種情況，根據(jù)所進(jìn)的樣品使用相應(yīng)的試劑超聲處理，若不能解決問(wèn)題，則更換。
 

　　使用保護(hù)柱。保護(hù)柱裝在分析柱之前，與分析柱的填料一致，一方面保護(hù)柱可以除去可能堵塞分析柱的顆粒物質(zhì)，另一方面保護(hù)柱可以吸附對(duì)分析柱有強(qiáng)烈吸附或者不可逆吸附的物質(zhì)，延長(zhǎng)分析柱的壽命。當(dāng)然，保護(hù)柱也是有一定壽命的，這就需要衡量一下使用保護(hù)柱是不是有意義。
 

　　在裝填技術(shù)已經(jīng)成熟的情況下，柱子壽命的差別更多的取決于使用者對(duì)柱子的使用和維護(hù)。樣品經(jīng)過(guò)前處理后過(guò)濾或離心，在進(jìn)色譜柱前經(jīng)過(guò)在線過(guò)濾器和保護(hù)柱。同時(shí)，在每次進(jìn)樣結(jié)束后，使用強(qiáng)溶劑沖洗柱子，出去柱子上的強(qiáng)保留物質(zhì)，也能延長(zhǎng)色譜柱的壽命。