C18液相色譜柱的操作方法

　　C18液相色譜柱用于分離樣品，是整個色譜系統(tǒng)的心臟。其質(zhì)量直接影響分離效果，檢測器將連續(xù)流動的樣品組分轉(zhuǎn)換為易于測量的電信號，由數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，以獲得樣品分離的色譜圖。記錄儀或數(shù)據(jù)工作站對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，參與HPLC儀器的自動控制。隨著技術(shù)的日益成熟和性能的不斷提高，它已成為分離復(fù)雜多組分混合物和多項(xiàng)目分析的主要方法，在各個領(lǐng)域有很大的取代填充柱的趨勢。
 

　　今天給大家分享一下C18液相色譜柱的操作方法：
 

　　1、有條件的情況下，新產(chǎn)品使用前按人工方法進(jìn)行柱效測試，確保正常。
 

　　2、工作溫度應(yīng)低于60℃。
 

　　3.將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，樣品需要溶解在原始流動相或類似極性的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，應(yīng)使用粒徑為0.5μm或更小的過濾器進(jìn)行過濾。如果樣品溶液中使用了強(qiáng)溶劑，為了獲得更好的峰形，需要減少進(jìn)樣量。
 

　　4、所有流動相，尤其是含有緩沖鹽的流動相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天準(zhǔn)備好；如果使用前一天配制的流動相，請確保流動相的pH值不發(fā)生變化，且流動相不會滋生細(xì)菌。流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料的類型。
 

　　當(dāng)復(fù)雜的樣品溶液通過吸附劑時，吸附劑通過極性相互作用、疏水相互作用或離子交換選擇性地保留目標(biāo)物和少量與目標(biāo)物性質(zhì)相似的組分，而其他組分穿透吸附劑流出小柱，再用另一種溶劑體系選擇性洗脫目標(biāo)化合物，從而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品的分離、純化和富集。在固相萃取過程中，“保留”和“洗脫”受三個因素的影響：目標(biāo)、吸附劑和溶劑。對于給定的目標(biāo)，選擇合適的吸附劑、樣品溶劑和洗脫溶劑是成功分離的關(guān)鍵。